等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀(HPLC)的類型,它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中,流動相的組成和比例在分析過程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后,樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)不同,它們在色譜柱中的移動速度也會不同,從而實現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測器,檢測器將樣品組分的信號轉(zhuǎn)換為電信號,經(jīng)過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析,最終生成分析報告。
1、流動相管理
溶劑純度:
定期檢查流動相的純度,使用合適純度的試劑,避免雜質(zhì)影響分離效果和損壞色譜柱。一般建議使用HPLC級或更高純度的試劑。
對于長期存放的流動相,要定期檢查是否有沉淀、變色等變質(zhì)跡象,如有問題應(yīng)及時更換。
溶劑過濾:
在配制流動相時,必須經(jīng)過0.45μm或更小孔徑的濾膜過濾,以去除可能存在的顆粒雜質(zhì),防止堵塞色譜柱和管路系統(tǒng)。
在線過濾器也需要定期清洗或更換,通常根據(jù)流動相的用量和污染情況,每隔一段時間進(jìn)行維護(hù)。
脫氣處理:
流動相在使用前要進(jìn)行充分的脫氣,以防止泵內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響泵的正常工作和檢測精度。常用的脫氣方法有超聲波脫氣、氦氣脫氣等。
對于在線脫氣裝置,也要定期檢查其工作狀態(tài),確保脫氣效果良好。
2、泵系統(tǒng)維護(hù)
壓力檢查:
每天開機(jī)后,檢查泵的進(jìn)出口壓力是否正常。如果壓力異常,可能是泵內(nèi)有氣泡、漏液或者管路堵塞等原因引起的,需要及時排查和解決。
定期檢查泵的密封墊圈是否完好,如有泄漏應(yīng)及時更換密封墊圈,以避免液體泄漏損壞泵和其他部件。
清洗泵頭:
定期清洗泵頭,去除可能積累的鹽類、雜質(zhì)等??墒褂煤线m的溶劑沖洗泵頭,如水、甲醇等,但要注意溶劑的兼容性和沖洗的順序,避免產(chǎn)生沉淀。
在清洗泵頭后,要確保泵頭干燥后再安裝使用,防止生銹。
3、進(jìn)樣系統(tǒng)維護(hù)
進(jìn)樣閥清洗:
每次進(jìn)樣結(jié)束后,用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑催M(jìn)樣閥,以防止樣品殘留在進(jìn)樣閥內(nèi),影響下一次進(jìn)樣的準(zhǔn)確性。一般可使用與流動相相似的溶劑進(jìn)行清洗。
定期對進(jìn)樣閥進(jìn)行深度清洗,可拆卸進(jìn)樣閥進(jìn)行超聲清洗,去除頑固的殘留物質(zhì)。清洗后要正確安裝進(jìn)樣閥,并進(jìn)行檢查確保其密封性良好。
樣品盤清潔:保持樣品盤的清潔,避免灰塵、雜物等污染樣品。定期擦拭樣品盤,并且檢查樣品瓶的放置是否牢固,防止樣品灑出。